运脾和络方通过调控Sirt1/AMPK信号通路并激活自噬而减轻糖尿病肾损伤

目的:观察运脾和络方减轻 Ⅱ型糖尿病大鼠肾损伤的作用并从 Sirt1-AMPK-自噬角度探讨其机制.方法:取 12周雄性 Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠24只,根据空腹血糖水平随机分为模型组、Sirt1过表达组和运牌和络方组,高脂高糖喂养 10周;另设 ZL大鼠作为正常对照组,普食喂养 10周.10周后留取尿液和血液检测肾功能指标,处死大鼠并取材留用.Western blot技术测定 Sirt1 、AMPK 、p-AMPK 、LC3 和P62蛋白水平的变化;real-time PCR技术检测 Sirt1 的 mRNA表达;HE染色和 Masson染色法检测肾组织的病理变化.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠空腹血糖(FBG)、尿蛋白(UP)、尿白蛋白(U-ALB)和血清肌酐(SCr)均明显升高(P ＜ 0.01);Sirt1的 mRNA下降(P ＜ 0.05),Sirt1、AMPK 、p-AMPK和 LC3-Ⅱ/-Ⅰ的蛋白水平明显降低(P ＜ 0.01),P62的表达明显升高(P＜0.01);肾小球局灶性纤维化,局灶性肾小管上皮细胞空泡变、坏死脱落及萎缩,出现管型,肾间质纤维增生.与模型组比较,Sirt1过表达组的 FBG明显降低(P＜0.01),运脾和络方组的 FBG无明显变化(P ＞0.05),Sirt1过表达组和运脾和络方组的 SCr和 U-ALB均降低(P ＜ 0.05);Sirt1的 mRNA表达增加(P ＜ 0.05),Sirt1、AMPK 、p-AMPK和 LC3-Ⅱ/-Ⅰ的蛋白水平明显升高(P＜0.01),P62的表达明显降低(P ＜ 0.01);Sirt1过表达组和运脾和络方组的肾脏病变均有不同程度减轻.结论:运脾和络方可能通过提高 Sirt1 表达水平,激活 AMPK,调节自噬,从而起到保护肾脏的作用.