大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中VDR、PKC及其相互作用对NaDC1表达的影响

目的:探究大鼠肾小管上皮细胞NRE-52E中蛋白激酶C(PKC)、维生素D受体(VDR)及其相互作用对钠离子依赖性二羧酸协同转运蛋白1(NaDC1)表达的影响.方法:体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRE-52E,采用PKC激动剂和PKC抑制剂干预NRE-52E细胞,并用VDR过表达载体及VDR-shRNA载体转染NRE-52E细胞,结合Western blot检测细胞中PKC、VDR和NaDC1的蛋白表达情况.结果:成功建立VDR稳定过表达和VDR稳定干扰的NRK-52E细胞株.与对照组比较,PKC激动剂组VDR和NaDC1蛋白表达量显著上调(P<0.01),VDR过表达组的PKC和NaDC1蛋白表达量显著上升(P<0.01),VDR干扰+PKC激动剂组和VDR过表达+PKC抑制剂组中PKC和NaDC1蛋白的表达水平均介于VDR干扰组与VDR过表达组之间.结论:在大鼠肾小管上皮细胞NRE-52E中PKC活性增强诱导VDR蛋白表达,PKC活性减弱抑制NaDC1蛋白表达;VDR与PKC和NaDC1的蛋白表达存在明显正相关;PKC与VDR相互作用时PKC高活性和VDR过表达是促进或维持NaDC1蛋白表达的主要因素.