β1-肾上腺素受体自身抗体通过激活内质网应激诱导心肌细胞凋亡

目的:探讨内质网应激在β1-肾上腺素受体自身抗体(β1-AA)引起心肌细胞凋亡中的作用.方法:采用β1-肾上腺素受体细胞外第二环抗原肽段主动免疫大鼠,应用SA-ELISA法检测大鼠血清中β1-AA的水平,TUNEL染色检测心肌组织的凋亡水平,Western blot法和免疫组化法检测心肌组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及caspase-12的蛋白表达.利用亲和层析法纯化的β1-AA处理H9c2心肌细胞,CCK-8法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡;采用内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)预处理H9c2心肌细胞,再给予β1-AA干预,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡的变化情况.结果:与对照组相比,主动免疫大鼠血清中β1-AA水平在免疫2周时显著增加,进一步增加至8周,并且主动免疫2周大鼠心肌组织凋亡率明显升高,持续升高至8周.与对照组相比,主动免疫大鼠心肌组织中GRP78、CHOP及caspase-12的蛋白表达在免疫4周和8周时均明显增加.β1-AA引起H9c2心肌细胞活力持续降低,凋亡明显增加.与β1-AA单独处理组相比,内质网应激抑制剂4-PBA预处理H9c2心肌细胞可以有效逆转β1-AA诱导的细胞凋亡增加和活力下降.结论:β1-AA可以通过激活内质网应激诱导心肌细胞凋亡.