bcl-3基因通过cyclin D1及Bax蛋白影响人结肠癌RKO细胞的凋亡
Chinese Journal of Pathophysiology(2017)
Abstract
目的:研究bcl-3基因对人结肠癌RKO细胞迁移及凋亡的影响及机制.方法:采用人bcl-3基因的RNA干扰慢病毒载体沉默人结肠癌RKO细胞bcl-3基因的表达后,划痕实验观察bcl-3基因沉默前后RKO细胞迁移能力的变化,Annexin V/PI双染色法检测bcl-3基因沉默前后RKO细胞凋亡率的变化,Western blot法检测bcl-3基因沉默前后细胞周期蛋白cyclin D1及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的变化.结果:划痕实验显示,划痕后36 h,bcl-3基因沉默前后RKO细胞划痕愈合率分别为84.00%及40.00%,差异具有统计学意义(P<0.05).Annexin V/PI双染色法流式细胞术分析显示,bcl-3基因沉默前后的RKO细胞均经5 μmol/L顺铂处理24 h后,沉默前后的RKO细胞凋亡率分别为12.89%及59.67%,差异具有统计学意义(P<0.05).Western blot法检测显示bcl-3基因沉默后cyclin D1蛋白表达显著下降(P<0.05),Bax蛋白表达显著上升(P<0.05),但Bcl-2表达无明显变化(P>0.05).结论:沉默bcl-3基因后,RKO细胞迁移能力下降,凋亡率增加,并伴细胞周期蛋白cyclin D1及凋亡相关蛋白Bax表达的变化.bcl-3基因可能通过改变cyclin D1及Bax蛋白的表达而影响RKO细胞的凋亡.
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Key words
bcl-3,Colorectal neoplasms,Apoptosis,Cell migration
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