番石榴叶总三萜改善3 T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗

目的：观察番石榴叶总三萜（TTPGL）对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用，并探讨其可能的作用机制。方法：培养3T3-L1前脂肪细胞并诱导其分化，给予TTPGL（0.3、1、3、10μg／L），并设溶媒（0.1％DMSO）组、阳性药正钒酸钠（ Van，10μmol／L）组、正常对照（ control）组和模型（ model）组，药物作用48 h。 MTT法检测药物对前脂肪细胞活力的影响，油红O染色法观察其对细胞分化的影响。建立IR模型后，药物处理48 h，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法（GOD-POD）检测IR脂肪细胞上清液中葡萄糖消耗量；比色法检测游离脂肪酸（FFA）水平；ELISA法检测脂肪因子分泌水平；real-time PCR检测IR脂肪细胞蛋白酪氨酸激酶1B（PTP1B）的mRNA表达量；Western blot检测磷酸化胰岛素受体底物1／胰岛素受体底物1（ p-IRS-1／IRS-1）和磷酸化蛋白激酶B／蛋白激酶B （ p-Akt／Akt）的蛋白水平。结果：与溶媒组比较，TTPGL显著提高了前脂肪细胞的活力并抑制其分化（ P＜0.01）。与IR溶媒组比较，无论在基础状态下还是胰岛素刺激状态下，TTPGL（1-10μg／L）均显著地促进了IR脂肪细胞葡萄糖消耗（P＜0.01）；TTPGL（0.3～3μg／L）显著抑制FFA的产生（P＜0.01）。与模型组比较，TTPGL（0.3和3μg／L）显著增加IR脂肪细胞脂联素的分泌（P＜0.05）并抑制TNF-α的分泌（P＜0.01），TTPGL（3μg／L）对抵抗素的分泌有显著抑制作用（P＜0.05），对瘦素分泌无显著作用；TTPGL（3μg／L）显著下调IR脂肪细胞PTP1B的mRNA表达（P＜0.01）；TTPGL（3μg／L）极显著上调p-IRS-1／IRS-1的水平；TTPGL（0.3和3μg／L）显著上调p-Akt／Akt的蛋白水平（ P＜0.05）。结论：TTPGL具有显著改善3T3-L1脂肪细胞IR的作用，其作用机制可能与TTPGL下调了IR脂肪细胞PTP1 B mRNA的表达、同时上调p-IRS-1／IRS-1和p-Akt／Akt的蛋白水平有关。