血管紧张素-（1-7）通过抑制TLR4激活和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤

目的：研究血管紧张素-（1-7）[Ang-（1-7）]能否通过抑制Toll样受体4（TLR4）激活和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖（HG）引起的H9c2心肌细胞损伤。方法：应用Western blot检测心肌细胞受体相互作用蛋白3（RIP3；反映坏死性凋亡的指标）和TLR4的表达水平；CCK-8法测定心肌细胞存活率；用试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶（ LDH）的活性；ELISA检测细胞培养液中白细胞介素-1β（ IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（ TNF-α）的分泌水平；双氯荧光素染色法测定细胞内活性氧簇（ ROS）水平；罗丹明123染色法测定线粒体膜电位（ MMP）。结果：HG（35 mmol／L葡萄糖）作用H9c2心肌细胞24 h可使RIP3的表达水平明显升高，应用30μmol／L TAK-242（ TLR4抑制剂）和HG共处理心肌细胞24 h可抑制HG对RIP3的上调；另一方面，HG可上调TLR4的表达，100μmol／L坏死性凋亡的特异性抑制剂necrostatin-1（Nec-1）和HG共处理心肌细胞24 h可抑制HG对TLR4的上调；而1μmol／L Ang-（1-7）和HG共处理心肌细胞24 h能同时抑制HG对RIP3和TLR4的上调。此外，1μmol／L Ang-（1-7）、30μmol／L TAK-242或100μmol／L Nec-1与HG共处理心肌细胞均能对抗HG引起的心肌细胞损伤，细胞存活率升高，LDH活性降低，ROS生成和MMP丢失减少，同时IL-1β和TNF-α的分泌减少。结论：Ang-（1-7）通过抑制TLR4激活和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖引起的H9 c2心肌细胞损伤。