葛根素对 RAW264.7源性泡沫细胞胆固醇摄取及外排功能的影响

wf(2016)

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摘要
目的:探讨葛根素(puerarin, Pur)对 RAW264.7源性泡沫细胞胆固醇摄取及外排功能的影响。方法:以氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导 RAW264.7源性泡沫细胞。细胞经处理后,利用荧光探针 DiI-ox-LDL 检测泡沫细胞摄取 ox-LDL 的能力,NBD 标记胆固醇外排实验检测泡沫细胞的胆固醇外排功能,Western blot 法检测 LC3II、P62、CD36、 ATP 结合盒转运蛋白 A1( ATP-binding cassette transporter A1, ABCA1)、溶酶体酸性脂肪酶(lysosomal acid lipase,LAL)以及 p-AMPK 的蛋白水平。结果: RAW264.7源性泡沫细胞经 Pur 处理后胆固醇摄取减少、胞内胆固醇外排增加并且自噬相关蛋白 LC3II 表达增加,P62表达减少,脂质吸收相关蛋白 CD36表达减少,胆固醇外排相关蛋白 ABCA1和 LAL 表达增加,其变化与自噬激动剂雷帕霉素处理后改变类似。 Pur 与自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤共处理后,胆固醇摄取增加、胆固醇外排功能减弱,并且 ABCA1、LAL 和p-AMPK 的蛋白水平减少,但 CD36表达未有明显改变。结论: Pur 可使得泡沫细胞 LAL 和 ABCA1介导的胆固醇外排能力有所增强,其机制可能是通过 AMPK 通路增强自噬对胆固醇外排的调控;又可通过对 CD36负向调节而使得泡沫细胞对脂质的摄取减少。
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关键词
Puerarin,Foam cells,Cholesterol metabolism,Autophagy
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