钩体内鞭毛蛋白基因重组质粒的构建、表达和免疫保护性研究

对钩端螺旋体病的有效预防亟需广谱、高效、安全、价廉的疫苗.为了获得重组表达的钩体内鞭毛亚单位蛋白抗原,以探讨制备新疫苗的途径,我们设计一对引物(P1=5'-GCC GTC GAC ATG ATT ATC AAT-3',P2=5'-GGC TAG CTA TTA GAT ATG CTG CAG-3'),以赖型017株钩体DNA为模板,利用PCR扩增其编码基因完整的开放阅读框架,扩增产物经Sal I、Cla I双酶切消化后定向克隆于pT7-7载体上,构建原核表达重组质粒pLF2.将该质粒转化入大肠杆菌JM109(DE3)中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示此产物相对分子量为34 kd.