脑缺血和缺血再灌注大鼠皮层神经元自噬的动态变化

目的:探讨脑缺血和缺血/再灌注不同时间大鼠大脑皮层神经元自噬的变化.方法:健康雄性SD大鼠60只,随机分为:假手术(Sham)组(n=10),脑缺血和缺血/再灌注模型组(n=50).模型组分别在缺血30min、2h,缺血2h再灌注1h、6h、24h五个时间点,随机抽取10只大鼠,测定脑梗死体积和脑含水量,同时采用Western印迹法测定各组大鼠大脑皮层中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)的水平,透射电镜检测大脑皮层神经细胞自噬情况.结果:脑缺血30min时LC3-Ⅱ/Ⅰ比值未见明显上升,缺血2h时LC3-Ⅱ/Ⅰ比值开始升高,明显高于Sham组(P＜0.01);缺血/再灌注1h、6h时LC3-Ⅱ/Ⅰ比值虽较缺血2h组有所下降,但仍明显高于Sham组(P＜0.05);缺血/再灌注24h时LC3Ⅱ/Ⅰ比值达高峰,明显高于Sham组(P＜0.01).透射电镜观察进一步证实该现象.缺血/再灌注6h和24h时大鼠脑梗死体积明显增加,与Sham组比较有统计学差异(P＜0.01).缺血/再灌注24h大鼠脑组织含水量明显增加,明显高于Sham组(P＜0.05).HE染色显示:仅在缺血/再灌注24h组大鼠皮层见组织水肿、疏松,部分细胞变性、凋亡,海马区见大量神经元细胞核皱缩、深染呈变性凋亡状.结论:局灶性脑缺血和缺血/再灌注模型中大脑皮层缺血2h神经元自噬即明显激活,缺血/再灌注1h、6h自噬均持续增高,缺血/再灌注24h自噬达高峰.