儿茶酚胺类应激激素促进小鼠肝癌细胞系H22中G0期细胞周期再入

目的 探讨应激激素对小鼠肝癌细胞系H22中G0期细胞周期再入的作用及机制.方法 CD44和CD133流式抗体染色确定H22细胞中是否存在肿瘤干细胞;体外应激激素皮质酮(CORT)、肾上腺素(EPI)和去甲肾上腺素(NE)处理H22细胞48 h后,Ki-67和PI流式抗体染色检测G0期细胞比例以及细胞周期变化;相应的受体拮抗剂验证介导G0期细胞周期再入的受体亚型;Western blot检测细胞周期相关蛋白Skp2和p27kip1表达水平.结果 H22细胞中肿瘤干细胞(CD44+CD133+)比例为0.80％ ±0.15％;与对照组相比,皮质酮处理后G0期细胞比例不变,而儿茶酚胺类应激激素EPI和NE处理后G0期细胞分别降低了62.50％和53.00％,同时,EPI和NE组H22细胞总数增加,G2/M和S期细胞比例升高;Skp2蛋白表达显著升高(P<0.05),p27kip1蛋白表达显著降低(P<0.05);与EPI和NE组相比,添加α1肾上腺素能受体拮抗剂特拉唑嗪和哌唑嗪处理后G0期细胞比例升高;哌唑嗪处理后Skp2蛋白表达显著降低(P<0.05),p27kip1蛋白表达显著升高(P<0.05).结论 儿茶酚胺类应激激素通过激活α1肾上腺素能受体促进小鼠肝癌细胞系H22中G0期细胞周期再入,其机制可能与S期激酶相关蛋白Skp2表达升高及其靶蛋白p27kip1的降解有关.