MCPIP1诱导乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞周期停滞

目的 研究单核细胞趋化蛋白诱导蛋白1(MCPIP1)在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的作用及机制.方法 用脂质体转染法转染细胞,在MDA-MB-231中分别过表达,或敲低MCPIP1并筛选稳定表达shRNA的单克隆;MTT法检测细胞增殖;流式细胞计量技术检测细胞周期;实时荧光定量PCR(q-PCR)检测靶基因半衰期;RNA免疫沉淀法(RNA-IP)检测MCPIP1结合的靶基因;荧光素酶报告基因实验检测调节基因3′非编码区(3′UTR)的能力.结果 过表达MCPIP1可显著抑制MDA-MB-231细胞增殖(P<0.05),敲低MCPIP1显著促进细胞增殖(P<0.05);并分别显著增加或降低G1期细胞百分比(P<0.01);MCPIP1显著降低细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期素依赖性激酶6(CDK6)、cyclin D1和cyclin E1 mRNAs的半衰期(P<0.01);MCPIP1结合细胞周期相关基因(P<0.05);MCPIP1显著降低含不同3′UTR的报告基因荧光素酶活性(P<0.05).结论 MCPIP1在乳腺癌细胞MDA-MB-231中发挥抑癌作用,诱导细胞周期G1期停滞可能是其发挥抑癌功能的机制之一.