自组装短肽K2I4K2在PCR中提高Taq DNA聚合酶热稳定性
Basic & Clinical Medicine（2016）
Abstract
目的 设计自组装短肽K2 I4 K2作为新型表面活性剂来稳定Taq DNA聚合酶,探索其对Taq DNA聚合酶在高温下的半衰期以及对PCR扩增效率的影响,探讨其在PCR中应用的可行性.方法 圆二色仪检测短肽K2I4K2在不同理化条件下的二级结构;原子力显微镜检测其自组装形成的纳米结构特征;紫外可见光谱检测其对Taq酶在高温下半衰期的影响;普通PCR验证其在PCR中应用的可行性;RT-qPCR检测其对Taq酶扩增效率的影响.结果 短肽K2 I4 K2在盐离子溶液中能自组装形成纳米纤维结构,且在高温下拥有稳定的二级结构;短肽K2I4K2使得Taq在95℃下的半衰期增加了约1.6倍;短肽K2 I4 K2组装24h后大大增加了Taq酶的扩增效率.结论 短肽K2I4K2较为显著地增加了Taq DNA聚合酶的热稳定性,能够很好地应用于PCR反应系统中.
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self-assembling peptide,nanofiber,half-life of Taq DNA polymerase,amplification of PCR
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