RNA干扰组蛋白去乙酰化酶4诱导骨肉瘤细胞凋亡

目的 探讨沉默组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)对骨肉瘤细胞HOS,U20S生物学行为的影响.方法 用脂质体瞬时转染法将化学合成HDAC4-siRNA转染至骨肉瘤HOS及U20S细胞中,实时荧光定量PCR(q-PCR)法检测细胞中HDAC4mRNA的表达;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞HDAC4及其下游基因HIF-1α的蛋白表达;CCK-8法检测细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell小室法检测细胞的侵袭能力.结果 转染后HOS及U20S细胞中HDAC4 mRNA表达明显降低(P＜0.01).沉默HDAC4后HOS细胞早期凋亡率为(16.8±2.1)％,较si-control组(10.2±2.5)％明显增加(P ＜0.05);U2OS细胞早期凋亡率为(21.4±3.1)％,较si-control组(12.5±2.3)％明显增加(P＜0.05);HOS细胞si-con组及si-HDAC4组细胞的穿膜细胞数分别为(146 ±34)个、(45±20)个,U2OS细胞为(207±35)个、(121±23)个,分别显著低于si-con组(P＜0.05).si-HDAC4能够明显降低HDAC4以及下游基因HIF-1 α的表达.结论 针对HDAC4基因的特异性RNA小干扰片段能够下调HDAC4mRNA及蛋白的表达,并抑制骨肉瘤细胞的增殖和侵袭,诱导细胞凋亡.