NOK癌基因对人胚肾293T细胞周期G1/S期的影响及其作用机制

目的 探讨NOK癌基因对人胚肾293T细胞周期G1/S期的影响,并研究NOK对G1/S期调控的作用机制.方法 用流式细胞仪对瞬时转染NOK及pcDNA3.0空载体的293T、293 ET及HeLa细胞进行周期检测,并用免疫印迹法(Western blot)在293T细胞中,对其细胞周期G1/S期检验点调控蛋白 cyclin D/E1及CDK2/4等蛋白水平进行检测.结果 瞬时转染NOK 1可使293T、293 ET及HeLa细胞G1期较转染空载体pcDNA3.0的细胞比例减少,S期比例增多(P＜0.05).转染NOK可使G1/S期检验点相关蛋白cyclin D、cyclin E1、p-CDK-2、p-CDK-4、p-Akt及p-Rb 蛋白的表达量上升,使P21及P53蛋白表达量下降.结论 NOK可促进细胞快速通过细胞G1/S期检测点,其机制涉及对Akt及CDK2/4通路的影响.