基于表达荧光蛋白的海分枝杆菌感染斑马鱼模型的抗结核药物评价方法的研究
Chinese Medicinal Biotechnology（2019）
摘要
目的 为了提高基于荧光检测的海分枝杆菌-斑马鱼感染模型的灵敏度和准确度,我们构建了毒力较弱的可以表达红色荧光蛋白的重组菌Mm927-pR2HYG,建立了斑马鱼感染模型,用于抗结核药物的药效评价和筛选.方法 重组菌Mm927-pR2HYG经受精卵卵黄囊注射感染斑马鱼幼鱼,通过测定斑马鱼致死率确定其对斑马鱼的感染性,并在激光共聚焦显微镜下观察其在斑马鱼体内的分布.同时应用荧光像素计数法对异烟肼和利福平的治疗效果进行评价.结果 成功构建了表达荧光蛋白的重组海分枝杆菌Mm927-pR2HYG感染斑马鱼模型.异烟肼和利福平两种抗结核药物在该模型中均具有良好的治疗作用;应用荧光像素计数法和qPCR计数法进行的药效评价结果具有较好的一致性.结论 重组海分枝杆菌Mm927-pR2HYG感染斑马鱼模型结合荧光像素计数法是一种快速、高效、直观的药物体内评价系统,可以用于抗结核药物的高通量筛选.
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