microRNA-20a靶向调控唾液酸转移酶ST8SIA2在结直肠癌耐药中的作用

目的 探究基于 miR-20a 为探针调控 ST8SIA2 在结直肠癌耐药中的功能和机制,为寻求逆转药物提供新的治疗策略及靶点.方法 采用 RT-PCR、Western blot 分别检测结直肠癌 Lovo细胞及其耐药细胞株 Lovo/5-FU 中 miR-20a、ST8SIA2 的表达水平;利用 CCK-8 及 Western blot 实验检测上调、下调 miR-20a 后两种细胞株的药物敏感性及其 ST8SIA2 的表达情况;靶基因预测及双荧光素酶报告实验验证 miR-20a与 ST8SIA2 的靶向关系;利用 CCK-8 实验进一步检测Lovo 细胞中 miR-20a 和 ST8SIA2 表达调控对细胞药物敏感性的影响.结果 ①与 Lovo 细胞相比, miR-20a 在耐药细胞株Lovo/5-FU 中呈现高表达,ST8SIA2 呈现低表达;②特异性上调 Lovo 细胞中 miR-20a 表达,ST8SIA2 表达减弱,该细胞的药物敏感性减弱;③特异性下调 Lovo/5-FU 细胞中 miR-20a 表达,ST8SIA2 表达增加,该细胞的药物敏感性增强;④特异性上调 Lovo 细胞中 ST8SIA2 表达,可逆转 miR-20a 对细胞产生的作用.结论 miR-20a 及 ST8SIA2 的表达水平与结直肠癌耐药性密切相关,miR-20a 可能是通过靶向负调控 ST8SIA2 的表达进而调控结直肠癌细胞的耐药.