小檗碱通过NF-κB信号通路调控缺氧复氧心肌细胞损伤

目的 研究小檗碱对缺氧复氧心肌细胞损伤的影响.方法 构建缺氧复氧心肌细胞损伤模型.将心肌细胞分成正常组(正常培养)、模型组(缺氧复氧处理)、小檗碱组(缺氧复氧处理前1h,添加50 μmol/L的小檗碱预处理)、小檗碱+PMA组(缺氧复氧处理前1h,添加50 μmol/L的小檗碱和1μmol/L的NF-κB信号激活剂PMA预处理),免疫印迹检测各组细胞中核因子-κB p65 (NF-κB p65)蛋白表达变化.用小檗碱及联合NF-κB信号激活剂处理缺氧复氧心肌细胞,MTT检测细胞增殖,二硝基苯肼显色法检测LDH漏出率,Annexin V-FITC/PI双染法测定细胞凋亡,免疫印迹检测Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平,黄嘌呤氧化法检测SOD活性,硫代巴比妥酸法检测MDA含量.结果 缺氧复氧处理后的心肌细胞中NF-κBp65蛋白水平升高,细胞增殖活性降低,LDH漏出率升高,细胞凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平升高,SOD活性降低,MDA含量升高.小檗碱可以降低缺氧复氧条件下心肌细胞中NF-κB p65蛋白表达水平,提高细胞增殖活性,降低LDH漏出率,减少细胞凋亡和细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平,提高SOD活性并减少MDA含量.NF-κB信号激活剂处理可以逆转小檗碱对缺氧复氧心肌细胞增殖、LDH漏出率、凋亡及SOD、MDA水平的影响.结论 小檗碱通过下调NF-1κB信号激活水平抑制缺氧复氧心肌细胞损伤.