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动态压应力促进软骨前体干细胞Sox9和细胞外基质表达的实验研究

wf(2016)

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Abstract
目的:研究间断性动态压应力对体外培养的大鼠软骨前体干细胞Sox9及软骨特异性细胞外基质表达的影响。方法细胞免疫磁珠分选并体外培养大鼠软骨前体干细胞(PSC),使用自行设计制备的细胞压力装置对细胞进行间断性(1 d刺激12 h,分别1 d,3 d和7 d)的压应力刺激(90 mmHg,1 mmHg=0.133 kPa),未刺激组为对照组,采用荧光实时定量聚合酶链反应检测各组细胞的Sox9和软骨特异性细胞外基质(Ⅱ型胶原)的基因表达情况,Western印迹检测细胞Sox9和Ⅱ型胶原蛋白表达水平并进行分析。结果在动态压应力刺激下,软骨前体干细胞各时间点Sox9和Ⅱ型胶原的基因表达水平明显增加并高于对照组(P<0.05);压力刺激1 d,3 d和7 d后,于对照组相比,其Sox9和Ⅱ型胶原mRNA表达水平分别增加了约1.9倍和2.1倍,3.5倍和3.4倍以及4.6倍和4.3倍。1 d压力组Sox9和Ⅱ型胶原蛋白表达与对照组无明显差异(P>0.05),3 d和7 d时间点的蛋白表达增加并高于对照组(P<0.05);Sox9和Ⅱ型胶原基因和蛋白表达水平都随着压应力刺激时间增加而增加。结论间断性动态压应力可以明显增加大鼠软骨前体干细胞Sox9和Ⅱ型胶原的表达,并可能会促进软骨前体干细胞向软骨细胞的分化。
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Stress,mechanical,Extracellular matrix,Stem cells
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