冷冻前后人脐带间充质干细胞免疫抑制能力的比较

目的：探讨冷冻对人脐带间充质干细胞（hUC-MSC）免疫调节功能的影响。方法对足月剖宫产新鲜脐带采用组织贴块法分离hUC-MSC，贴壁培养，传代纯化冷冻后，在体外将γ-干扰素（IFN-γ）刺激后新鲜和冻融hUC-MSC与混合淋巴细胞共培养，实验检测激活的新鲜和冻融hUC-MSC对混合淋巴细胞增殖抑制的变化。用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）实验和酶联免疫吸附分析（ELISA）实验检测激活后新鲜和冻融hUC-MSC基因吲哚胺-2，3-双加氧酶（IDO）、转化生长因子β（TGF-β）、环氧合酶2（COX-2） mRNA和前列腺素E2（PGE2）的表达变化情况。结果 IFN-γ可以增强新鲜和冻融hUC-MSC对活化的人外周血单个核细胞（hPBMC）的增殖抑制能力，但冻融hUC-MSC对活化的hPBMC 的增殖抑制能力明显弱于新鲜hUC-MSC增殖抑制能力（P<0．05）。IFN-γ刺激24 h后，上调新鲜和冻融hUC-MSC表达免疫抑制基因IDO mRNA 和TGF-β mRNA，但冻融hUC-MSC 表达免疫抑制基因IDO mRNA 和 TGF-β mRNA 低于新鲜hUC-MSC（P<0．05）。 IFN-γ刺激24 h后，hUC-MSC分泌PGE2具有降低趋势，并且冻融hUC-MSC分泌PGE2水平明显少于新鲜hUC-MSC的分泌水平（P<0．05）。IFN-γ刺激24 h后冻融hUC-MSC比新鲜hUC-MSC表达环氧合酶2（COX-2）明显降低（P<0．05），并且冻融hUC-MSC比新鲜hUC-MSC表达COX-2明显降低（P<0．05）。结论冷冻保存hUC-MSC免疫抑制潜能被保留，这些细胞保持其抑制混合淋巴细胞增殖的能力，但其激活的能力下降。