新型纳米支架对神经干细胞生物行为及相关基因表达的影响

背景:利用纳米技术制各的支架可形成与天然生物体内基底膜结构相似的表面结构,对种子细胞的行为进行有效调节.目的:观察平行与交错排列纳米纤维膜对神经干细胞增殖及分化等生物学行为的影响.方法:以Ⅰ型胶原为材料,利用静电纺织技术制备平行排列纳米纤维膜与交错排列的纳米纤维膜.将新生大鼠神经干细胞接种于两种纳米纤维膜表面,以单独的细胞培养为对照,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞增殖周期变化,免疫组化分析细胞神经元分化率,实时定量PCR技术检测Bcyclin D1及CDK2基因表达.结果 与结论:①平行排列组、交错排列组培养1,3,5,7,9d的细胞增殖吸光度值均高于对照组(P＜0.05),平行排列组培养3,5,7,9d的细胞增殖吸光度值高于交错排列组(P＜0.05);②平行排列组、交错排列组增殖期细胞比率高于对照组(P＜0.05),并且平行排列组高于交错排列组(P＜0.05);③免疫组化显示,3组细胞的神经元分化率比较差异无显著性意义(P＞0.05);④实时定量PCR技术检测显示,平行排列组、交错排列组Bcyclin D1及CDK2基因表达量高于对照组(P＜0.05),并且平行排列组高于交错排列组(P＜0.05);⑤结果表明,平行及交错排列纳米纤维膜可促进神经干细胞的增殖,对细胞分化无明显影响,能够从基因表达水平调节神经干细胞的生物学行为.