猪结肠脱细胞支架联合结肠癌HCT116细胞的体外共培养

背景:近年来脱细胞支架己被广泛用于各种肿瘤的研究,支架的空间排列、生物力学性质和生物相容性等特性均有助于还原肿瘤细胞生长的微环境.目的:探讨猪结肠脱细胞支架作为结肠癌体外模型的特点与优势.方法:将新鲜猪结肠以2％SDS、1％Triton X-100及0.5％EDTA浸泡结合反复振荡的方法进行脱细胞处理,制备猪结肠脱细胞支架.将人结肠癌HCT116细胞接种于猪结肠脱细胞支架黏膜面,活-死染色观察支架上的细胞生长情况,鬼笔环肽染色观察支架上的细胞形态,苏木精-伊红染色与免疫荧光染色观察细胞在支架上的纵向生长情况.结果 与结论:①活-死染色显示,培养第1天,HCT116细胞能很好地聚集在支架黏膜层的孔隙内,少见死细胞;第3天时,细胞逐渐向孔隙外蔓延生长,小部分细胞已生长连接成片,无死细胞;第7天时,细胞生长密度进一步增大,在黏膜层表面生长成片,无死细胞与脱落细胞;②培养第7天苏木精-伊红染色及免疫荧光染色显示,部分HCT116细胞可在孔隙内生长成团,并有部分细胞沿着孔隙继续向黏膜下层生长,表现出原位肠癌浸润性生长的特点;③培养第7天鬼笔环肽染色显示,HCT116细胞与支架黏膜层在超微结构水平上有紧密的接触,并且具有分化良好的上皮形态特征;④结果表明,猪结肠脱细胞支架可作为结肠癌细胞三维培养的载体.