猪骨髓间充质干细胞抑制脂多糖诱导炎症反应改善猪胰岛细胞功能损伤
Chinese Journal of Tissue Engineering Research(2021)
摘要
背景:猪胰岛移植是治疗糖尿病的常用手段,但炎症反应和氧化应激会导致猪胰岛移植的远期效果欠佳.猪骨髓间充质干细胞已被证实与胰岛联合移植可改善移植物的功能.但关于猪骨髓间充质干细胞通过调节胰岛细胞中miR-299-5p的表达来调控胰岛β细胞功能和存活率还尚未被报道.目的:探讨猪骨髓间充质干细胞通过miR-299-5p/SIAH1分子轴调控JNK/C-Jun信号通路对猪胰岛细胞功能损伤的影响.方法:用脂多糖诱导猪胰岛细胞功能损伤,然后与骨髓间充质干细胞共培养24 h,采用ELISA检测猪胰岛细胞中白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、活性氧、超氧化物歧化酶及胰岛素水平,Hoechst 33258染色观察猪胰岛细胞凋亡情况,Annexin V-FITC/PI检测猪胰岛细胞凋亡率,Western blot检测SIAH1和JNK/C-Jun信号通路相关蛋白表达;qPCR检测猪胰岛细胞中与胰岛细胞功能损伤有关的miRNAs表达;双荧光素酶报告基因验证miR-299-5p和SIAH1的靶向关系.结果与结论:①猪骨髓间充质干细胞抑制脂多糖引起的白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、活性氧上调和促凋亡作用,同时也抑制脂多糖引起的超氧化物歧化酶、胰岛素分泌量下调作用;②猪骨髓间充质干细胞显著上调miR-299-5p表达,miR-299-5p可通过靶向下调SIAH1表达抑制JNK/C-Jun信号通路激活;③结果表明,猪骨髓间充质干细胞通过调控miR-299-5p/SIAH1分子轴抑制JNK/C-Jun信号通路激活,抑制脂多糖诱导的炎症反应、氧化应激和猪胰岛细胞凋亡,并促进胰岛素分泌,从而改善猪胰岛细胞功能.
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