绞股蓝皂苷减轻H2O2诱导大鼠成骨细胞氧化应激损伤的机制

背景:绞股蓝皂苷具有抗氧化作用,多应用于降血压、抗衰老、抗肿瘤等,但其具体保护机制尚不明确,对氧化应激损伤的成骨细胞增殖、分化的影响亦未知.目的:探讨绞股蓝皂苷减轻大鼠成骨细胞氧化应激损伤的机制,以及对氧化损伤的成骨细胞的增殖、分化的影响.方法:采用分离乳鼠颅骨细胞的单层培养法培养成骨细胞,实验分为3组,以普通生长培养基为空白组,以普通生长培养基+氧化损伤为对照组,以含绞股蓝皂苷的培养基+氧化损伤为实验组.实验组和对照组成骨细胞经含150 μmol/L H2O2的生长培养基诱导氧化损伤模型.干预3,5 d CCK8法检测绞股蓝皂苷对氧化损伤的成骨细胞活性的影响;在诱导后第7天采用碱性磷酸酶染色检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性;诱导第21天采用茜素红染色观察成骨细胞矿化情况;Western blot检测NOX4、骨形态发生蛋白2和Smad4的蛋白表达量.实验方案经广州中医药大学动物实验伦理委员会批准.结果 与结论:①绞股蓝皂苷可促进氧化损伤的成骨细胞增殖;②碱性磷酸酶染色和茜素红染色结果表明绞股蓝皂苷对受氧化应激损伤的成骨细胞的分化有一定促进作用;③与对照组相比,绞股蓝皂苷可下调实验组NOX4蛋白的表达,上调实验组骨形态发生蛋白2和Smad4蛋白的表达(P＜0.05);④结果说明,绞股蓝皂苷对H2O2诱导的成骨细胞氧化应激损伤具有一定的保护作用,并且对损伤的成骨细胞有促进增殖分化的作用,其机制可能与抑制NOX4蛋白表达并激活BMP/Smad通路有关.