电针脊髓损伤模型大鼠"足三里"与"伏兔"穴神经细胞凋亡因子Caspase-3的表达

背景:中医自《内经》开始就提出了"治痿独取阳明"之理论,但是有关电针干预足阳明胃经治疗脊髓损伤的报道相对较少.目的:探讨电针刺激"足三里""伏兔"穴对脊髓损伤大鼠受损节段Caspase-3表达的影响.方法:将64只SPF级SD雌性大鼠随机分为4组,即对照组、预标记组、损伤后标记组和电针干预组,每组16只.对照组及预标记在操作前给予Brdu(50 mg/kg)连续10 d腹腔注射标记细胞,对照组于第11天给予咬除椎板,并不损伤脊髓,预标记组第11天给予制作脊髓损伤模型;损伤后标记组及电针组在制作脊髓损伤后连续10 d腹腔注射Brdu标记细胞,其中损伤后标记组不给予干预措施,电针组造模后第3天开始针刺足三里、伏兔穴.各组分别于损伤后3,10,17,24 d取脊髓组织,运用苏木精-伊红染色观察神经元数量的变化;免疫组织化学染色观察Brdu阳性细胞表达;qRT-PCR技术检测Caspase-3 mRNA的变化;Western blot检测Caspase-3蛋白表达的变化.实验方案经广西医科大学动物实验伦理委员会批准(批准号201712001).结果与结论:①脊髓损伤以后Caspase-3的mRNA及蛋白表达均高于脊髓没有受到损伤的对照组,脊髓损伤后神经元的数量明显较对照组少;随着时间的推移,预标记组、损伤后标记组及电针干预组Caspase-3 mRNA及蛋白表达先升高后降低,而电针组的Caspase-3表达明显减少,与预标记组及损伤后标记组比较差异有显著性意义(P<0.05);②苏木精-伊红染色显示随着时间的推移电针组的神经元数量明显比未经干预的预标记组、损伤后标记组高,在第24天时逐渐接近对照组的神经元数量;③免疫组织化学结果显示电针组阳性蛋白表达呈先升高后降低的趋势,17 d升至最高,24 d降至最低,整体阳性蛋白表达高于其他组(P<0.05);④结果说明,电针刺激"足三里""伏兔"穴可以减少Caspase-3 mRNA及蛋白表达,减少神经细胞的凋亡,同时可以促进神经元数量的增加,从而促进神经细胞的再生修复.