miR-410可促进骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞

背景:骨髓间充质干细胞成软骨分化对骨关节炎的治疗具有重要意义,但是涉及的具体机制目前仍不明确.目的:探讨miR-410在促进骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞中的作用机制.方法:从接受全髋关节置换的骨关节炎患者中获得骨髓抽取物并分离骨髓间充质干细胞.使用慢病毒将miR-410或miR-410抑制剂转染到骨髓间充质干细胞中,然后加入成软骨诱导分化培养液进行成软骨诱导,采用阿利辛蓝染色检测成软骨分化能力、MTT法检测细胞增殖能力、流式细胞术检测细胞周期变化、RT-PCR和Western blot检测软骨相关标志物Sox9和Has2 mRNA、蛋白水平变化.结果与结论:①骨髓间充质干细胞成软骨诱导分化过程中miR-410表达显著升高;②转染miR-410组的骨髓间充质干细胞miR-410表达水平显著升高,而miR-410抑制组显著降低;③转染miR-410组骨髓间充质干细胞增殖能力显著增强,miR-410抑制组在G0/G1期阻断骨髓间充质干细胞增殖;④miR-410转染显著促进骨髓间充质干细胞向软骨分化,miR-410转染增加了Sox9、Has2的mRNA和蛋白质水平;⑤miR-410是骨髓间充质干细胞向软骨分化的正调控因子,具有加速细胞周期和增强细胞活力的作用.