白藜芦醇修复内皮细胞氧化损伤抑制促血栓分子表达的作用和机制

背景:相关研究表明,白藜芦醇具有抗氧化、抑制动脉血栓的作用.目的:探讨白藜芦醇保护内皮细胞氧化损伤,抑制深静脉血栓形成的分子作用.方法:使用人脐静脉内皮细胞进行传代培养;实验分3组:①对照组为正常培养液中培养24 h;②H2O2组在培养液中加入200μmol/L H2O2培养24 h;③H2O2+白藜芦醇组:先分别予以10,20,30μmol/L的白藜芦醇预处理2 h,再加入200μmol/L H2O2培养24 h.采用MTT法检测细胞活力;Hoechst 33258染色法、荧光显微镜观察细胞凋亡;Western blot检测P-选择素、P-选择素糖蛋白配体1、血管性血友病因子及PI3-K/Akt/GSK3β、NF-κB信号通路关键蛋白表达.结果与结论:①与对照组相比,H2O2能够诱导内皮细胞损伤,白藜芦醇对H2O2诱导的内皮细胞损伤具有修复作用(P<0.05);②与对照组相比,H2O2组细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与H2O2组相比,H2O2+白藜芦醇组细胞凋亡率明显减少(P<0.05);③与对照组相比,H2O2组P-选择素、P-选择素糖蛋白配体1、血管性血友病因子、NF-κB和GSK3β蛋白的表达显著上调(P<0.05),Akt总蛋白无明显变化(P>0.05),pAkt蛋白表达下调(P<0.05);与H2O2组相比,H2O2+白藜芦醇组上述蛋白表达被逆转(P<0.05);④结果表明,白藜芦醇能够修复静脉内皮细胞氧化损伤,对P-选择素、P-选择素糖蛋白配体1、血管性血友病因子蛋白表达具有抑制作用,其机制可能与PI3-K/Akt/GSK3β、NF-κB信号通路相关.