抗坏血酸促进骨髓间充质干细胞的上皮转分化

背景:研究表明,抗坏血酸具有增强血管弹性、强化骨骼、抗氧化的作用.目的:通过体外细胞分子生物学实验,观察抗坏血酸对骨髓间充质干细胞上皮转分化的促进作用.方法:不同浓度(0,10,20,40 μmol/L)抗坏血酸处理骨髓间充质干细胞,光镜下观察骨髓间充质干细胞形态变化,筛选出最适处理浓度和时间(40 μmol/L抗坏血酸干预48 h),进一步Realtime PCR检测骨髓间充质干细胞上皮相关分子E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白及间质相关分子snail1、转化生长因子β的表达,Western blot检测骨髓间充质干细胞内干性相关分子Oct4,Nanog,Sox2的表达.结果与结论:①光镜下观察,抗坏血酸处理24 h,骨髓间充质干细胞的形态开始由长梭形逐渐向形态较圆润的上皮细胞转化.随着抗坏血酸浓度的上调,形态学变化越显著.抗坏血酸处理48 h,光镜下约有90％以上的细胞出现以上变化;②抗坏血酸可通过上调骨髓间充质干细胞上皮相关分子(N-钙黏蛋白,E-钙黏蛋白)并下调间质相关分子(snail1,转化生长因子β)的表达,促进骨髓间充质干细胞间质上皮转化;③抗坏血酸在促进骨髓间充质干细胞间质上皮转化的同时,骨髓间充质干细胞干性(Oct4,Sox2,Nanog表达)未发生明显变化.