骨髓间充质干细胞分离培养方法及其对CD8+T淋巴细胞的免疫调控

背景：骨髓间充质干细胞具有免疫调节特性，使其在免疫抑制方面有可预期的应用价值。目的：探讨骨髓间充质干细胞的分离培养方法及其对CD8+T淋巴细胞的免疫调控。方法：采用骨髓直接贴壁法获得原代Wistar大鼠骨髓间充质干细胞，利用差速贴壁结合消化法纯化原代细胞，加入Ⅰ型胶原蛋白作为细胞外基质，扩增骨髓间充质干细胞。取第2代骨髓间充质干细胞，分别将0，1×103，1×104，1×105/wel 的骨髓间充质干细胞与CD8+T淋巴细胞共培养，植物血凝素刺激68 h，荧光CFSE法观察CD8+T淋巴细胞聚集，MTT法检测CD8+T淋巴细胞增殖率。结果与结论：①不同密度骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞均有抑制作用，1×103/wel 组抑制能力最弱，形成集落现象；1×105/wel 组抑制能力最强，细胞未见明显聚集现象；②1×103，1×104，1×105/wel 组CD8+T淋巴细胞增殖率分别为(44.83±4.92)%、(31.94±6.28)%及(15.77±3.98)%，3组间两两比较差异均有显著性意义(P<0.05)；③结果表明，采用全骨髓直接贴壁法能获得原代大鼠骨髓间充质干细胞，采用差速贴壁联合消化控制法能完成细胞纯化，骨髓间充质干细胞浓度依赖性抑制T淋巴细胞增殖。