人骨骼肌来源不同表面标志物间充质干细胞特定亚群的多向分化潜能

Chinese Journal of Tissue Engineering Research(2017)

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摘要
背景:骼肌来源的间充质干细胞,在骨形态发生蛋白4等因子的调节下具有多向分化潜能,但具体细胞亚群的分化情况尚不十分明确.目的:观察人骨骼肌来源的不同表面标志物的间充质干细胞特定亚群的多向分化潜能.方法:应用流式细胞分选技术,分选出具有不同细胞表面标志物的人骨骼肌干细胞亚群,根据CD56及CD34/CD144的表达差异,将细胞分成CD56+,CD56+CD34+CD144+,CD34+CD144+及未分选组共4组,对比不同细胞亚群组在骨形态发生蛋白4成骨诱导或骨形态发生蛋白4+转化生长因子β3成软骨诱导后的差异.通过碱性磷酸酶染色后碱性磷酸酶阳性细胞的百分比评估细胞骨代谢情况.将各亚群细胞进行3D培养和细胞因子处理后,通过硝酸银染色评估其成骨分化程度,通过阿尔新蓝染色评价成软骨分化程度.结果与结论:①细胞骨代谢:经骨形态发生蛋白4处理后,4组细胞的碱性磷酸酶阳性细胞的百分比差异无显著性意义(P>0.05);②细胞分化:不同表面标记物的4组细胞成骨及成软骨分化有明显差异,在相同成骨培养条件下,CD56+组成骨能力最强;相同成软骨培养条件下,CD56+,CD56+CD34+CD144+组呈阿尔新蓝染色阳性,CD56+CD34+CD144+组的染色更深且区域更大;③结果证实,成骨与成软骨潜能与不同的人骨骼肌间充质干细胞类型有关.人骨骼肌来源的间充质干细胞CD56+亚群和成骨潜能有密切关系.同时CD56+CD34+CD144+亚群分化能力更强,具有更强的成软骨潜能.
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