舒芬太尼对神经干细胞移植治疗脊髓损伤的影响

背景:有研究显示舒芬太尼联合神经干细胞移植联合治疗可以提高新生的神经纤维数量.目的:观察舒芬太尼干预对神经干细胞移植治疗脊髓损伤大鼠后肢功能恢复的影响.方法:①将100只成年雌性SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、舒芬太尼组、神经干细胞移植组和舒芬太尼+神经干细胞移植联合治疗组,每组20只.正常对照组大鼠不实施任何干预,其他4组参照改良的Al en's重物打击法建立大鼠脊髓损伤模型;②造模6 h后,联合治疗组大鼠蛛网膜下腔注射10μL细胞浓度为1×1010 L-1的神经干细胞悬液,腹腔注射100μL舒芬太尼(150μg/kg);神经干细胞移植组大鼠蛛网膜下腔注射10μL细胞浓度为1×1010 L-1的神经干细胞悬液,腹腔注射100μL生理盐水;舒芬太尼组蛛网膜下腔注射10μL的神经干细胞培养液,腹腔注射100μL舒芬太尼(150μg/kg);模型组大鼠蛛网膜下腔和腹腔各注射10μL神经干细胞培养液和100μL生理盐水;③造模后72 h,RT-PCR检测脊髓损伤区周围AQP4、MMP9 mRNA的表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况;④造模后第1,3天和第1,2,3,4周通过BBB评分、斜板实验进行运动功能评定;⑤造模后4周取材行苏木精-伊红染色,荧光显微镜观测CM-Dil标记的神经干细胞存活情况,荧光金逆行追踪观察脊髓神经纤维的再生与分布情况.结果与结论:①造模后72 h,与模型组、舒芬太尼组、神经干细胞移植组比较,联合治疗组脊髓损伤区AQP4、MMP9 mRNA表达和细胞凋亡率显著降低(P<0.05);②造模2周后,联合治疗组运动功能评分优于舒芬太尼组和神经干细胞移植组(P<0.05),舒芬太尼组和神经干细胞移植组优于模型组(P<0.05);③造模后4周,模型组可见脊髓空洞形成,舒芬太尼组和神经干细胞移植组损伤区脊髓空洞较小,联合治疗组脊髓空洞几乎消失;④联合治疗组CM-Dil阳性细胞最多,神经干细胞移植组较多,舒芬太尼组和模型组未见阳性细胞;⑤联合治疗组荧光金阳性神经纤维数最多,舒芬太尼组和神经干细胞移植组次之,模型组最少;⑥结果表明,舒芬太尼通过促进移植神经干细胞的增殖,减少大鼠脊髓损伤区AQP4、MMP9表达和局部神经细胞凋亡,进而改善后肢运动功能.