原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及机制研究：随机对照实验方案

背景：前期研究采用2-DE/MALDI-TOF/MS方法，发现原肌球蛋白4在脊髓表达增加，但迄今为止，有关原肌球蛋白4与脊髓损伤的发病机制和进展的关系仍知之甚少。
　　方法/设计：①随机对照动物实验：建立脊髓全横断损伤大鼠模型，通过2-DE双向电泳、氨基酸系列分析、q-PCR和Western-Blot方法明确脊髓横断损伤3-28 d在损伤脊髓头侧原肌球蛋白4的表达变化。②基因水平的机制探索实验：用基于体外慢病毒重组体技术敲除原肌球蛋白4，研究其对体外培养的脊髓神经元树突生长长度的作用；并通过BBB评分法评估原肌球蛋白4敲除对脊髓横断损伤大鼠运动功能恢复的作用。
　　讨论：实验结果拟为脊髓横断损伤后促进运动功能恢复的治疗提供一种基于慢病毒重组体为载体携带原肌球蛋白4干扰RNA的、新的、有效的分子治疗策略，并阐明其治疗作用机制，为临床脊髓全横断损伤的基因治疗开辟乐观的应用前景。
　　伦理批准：研究经昆明医科大学医学伦理委员会批准，大鼠的外科操作和术后护理遵循中国实验动物保护和伦理委员会的规定，并与美国国立卫生与健康研究院的指南一致。