滑膜间充质干细胞与软骨细胞三维条件下混合培养向软骨细胞的分化

背景：软骨细胞通过自分泌及旁分泌的作用可以为滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化提供所需的生长因子及微环境，三维条件下更有利于细胞的黏附增殖与分化。
　　目的：观察滑膜间充质干细胞与软骨细胞混合培养于壳聚糖/Ⅰ型胶原复合支架材料中向成软骨细胞分化的能力。方法：取SD大鼠滑膜组织及软骨组织，用酶消化法获得滑膜间充质干细胞及软骨细胞分别进行培养。取第3代滑膜间充质干细胞及第2代软骨细胞，将二者以1∶2的比例混合培养负载于壳聚糖/Ⅰ型胶原复合支架材料21 d，进行激光共聚焦扫描及免疫组织化学检测。
　　结果与结论：培养72 h后，扫描电镜观察细胞黏附于支架材料表面，并可见细胞分泌大量基质成分。培养21 d后，激光共聚焦扫描可见细胞在支架表面分布均匀，逐层扫描后细胞逐渐减少。免疫组织化学检测可见基质能被Ⅱ型胶原染色，细胞染色呈现棕黄色。结果表明壳聚糖/Ⅰ型胶原复合支架材料提供三维生长空间，利用软骨细胞分泌生长因子及细胞间的相互作用可以诱导滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化。