爱泼斯坦-巴尔病毒操控鼻咽癌细胞HONE-1的miR-590-5p逃避免疫的机制研究

目的 探讨爱泼斯坦-巴尔病毒 ( Epstein-Barr virus, EBV) 操控鼻咽癌细胞HONE-1的miR-590-5p以实现逃避免疫的机制研究.方法 通过miRDB在线分析miR-590-5p与泛素E3连接酶 ( itchy E3 ubiq-uitin protein ligase, ITCH) 的匹配情况, 然后通过荧光素酶报告系统检测miR-590-5p是否靶向ITCH; 使用miR-590-5p mimics过表达或者miR-590-5p inhibitor敲低miR-590-5p的情况下, 通过免疫印迹检测ITCH与其底物MAVS的表达量, 通过酶联免疫吸附试验检测鼻咽癌细胞HONE-1上清液中干扰素γ ( interferon-γ, IFNγ) 的表达量, 同时检测EBV的复制情况.结果 EBV感染鼻咽癌细胞HONE-1后miR-590-5p的表达量显著下降 (P<0.05), 并且miR-590-5p靶向ITCH的3′UTR.过表达miR-590-5p后, 发现鼻咽癌细胞HONE-1的ITCH表达量降低, 线粒体抗病毒信号蛋白 ( mitochondrial antiviral signaling protein, MAVS) 泛素化水平下降, MAVS的表达量升高, IFNγ表达升高 ( P<0.05), EBV复制水平下降 ( P<0.05).敲低miR-590-5p后, 发现鼻咽癌细胞HONE-1的ITCH表达量上升, MAVS泛素化水平上升, MAVS的表达量下降, IFNγ表达下降 (P<0.05), EBV复制水平上升 (P<0.05).过表达miR-590-5p的同时敲低MAVS或敲低miR-590-5p的同时过表达MAVS后, EBV病毒的复制没有明显差异 (P>0.05).结论 EBV通过抑制miR-590-5p的表达量以提高MAVS的泛素E3连接酶ITCH的表达量, 降低鼻咽癌细胞HONE-1的IFNγ表达量, 最终实现自身复制的增强.