TGF-β1对胃癌细胞增殖、凋亡及miR-302a和AKT通路的影响

目的 探究转化生长因子-β1 ( TGF-β1) 对胃癌细胞增殖、凋亡及miR-302a和AKT通路的影响.方法 在含有TGF-β1 (0、 1、 5、 10 ng/ml) 的培养基培养胃癌细胞系BGC-823, MTT法检测细胞增殖情况; 平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数量; Hoechst33258染色观察细胞形态; 流式细胞术检测细胞凋亡以及周期阻滞情况; 实时荧光定量PCR ( qRT-PCR) 检测细胞miR-302a表达; 蛋白印迹 ( WB) 法检测p-PI3K、 AKT、 p-AKT蛋白表达情况.结果 与Control组相比, TGF-β1 处理组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高, 细胞克隆数量降低, 且随着TGF-β1浓度的增加, 细胞增殖抑制率、细胞凋亡率逐渐升高,细胞克隆数量逐渐降低 (P<0.05).与Control组相比, TGF-β1处理组G1期细胞比例显著增加, G2期细胞比例显著降低, 且随着TGF-β1浓度的增加, G1期细胞比例逐渐增加, G2期细胞比例逐渐降低 (P<0.05).与Control组相比, TGF-β1处理组miR-302a表达升高, p-PI3K、 p-AKT蛋白表达水平均显著降低, 且随着TGF-β1浓度的增加, miR-302a 表达逐渐升高, p-PI3K、 p-AKT 蛋白表达逐渐降低 ( P <0.05).结论 TGF-β1可能通过上调miR-302a表达、抑制AKT通路, 使细胞G1期阻滞, 从而抑制胃癌细胞增殖, 促进其凋亡.