土木香内酯对Rb Y79生长、侵袭和JAK2STAT3磷酸化影响
Journal of Medical Molecular Biology(2019)
Abstract
目的 探究土木香内酯对视网膜母细胞瘤Y79生长, 侵袭和JAK2STAT3磷酸化影响的机制.方法 体外培养视网膜母细胞瘤Y79, 并分为空白对照组 ( Control)、低、中、高剂量组 (分别为 Ala 10、20、 50 μmol/L); 使用Edu染色检测细胞生长情况; 使用Hoechst染色检测细胞凋亡情况; 使用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力; 使用Westen印迹检测Ki67、 PCNA、 VEGF、 MMP-14蛋白表达情况和JAK2/STAT3的磷酸化情况; 建立视网膜母细胞瘤小鼠模型, 并分为空白对照组 ( Control)、低、中、高剂量组(分别为Ala 10、 30、 90 μmol/L).将上述剂量的土木香内酯分别注射入小鼠腹腔, 30 d后, 检测瘤重量,使用免疫组化检测组织Ki67和MMP-14的表达.结果 细胞实验结果显示: 相比空白对照组, 使用土木香内酯处理后的视网膜母细胞瘤Edu染色呈红色细胞数目、单位面积细胞侵袭数目、 Ki67、 PCNA、 VEGF、MMP-14 p-JAK2和p-STAT3显著降低, 且高剂量组上述指标显著低于中剂量组, 中剂量组上述指标显著低于低剂量组 (P<0.05); 相比空白对照组, 其它各组 JAK2 和 STAT3 蛋白质水平均无显著变化 ( P >0.05); 相比空白对照组, 细胞凋亡率显著升高, 且高剂量组细胞凋亡率显著高于中剂量组, 中剂量组细胞凋亡率显著高于低剂量组 (P<0.05).小鼠体内实验结果显示: 与空白对照组比较, 使用土木香内酯处理后小鼠肿瘤质量、 Ki67和MMP-14阳性率显著降低, 且高剂量组上述指标显著低于中剂量组, 中剂量组上述指标显著低于低剂量组 (P<0.05).结论 土木香内酯可以通过降低细胞侵袭迁移相关蛋白, 升高凋亡相关蛋白, 抑制视网膜母细胞瘤Y79的侵袭迁移促进细胞凋亡.
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Key words
retinoblastoma Y79,Alantolactone,phosphorylation of JAK2STAT3,cell invasion
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