人IGF1R启动子克隆及荧光素酶报告基因载体构建
JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY（2014）
摘要
目的 克隆人IGF1R基因启动子序列,构建IGF1R基因启动子荧光素酶报告基因载体.方法 运用PCR方法从HeLa细胞基因组DNA中获得目的 基因;双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建IGF1R基因启动子报告基因载体;将重组质粒转染至HeLa细胞48 h后,采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性.结果 PCR扩增出800 bp左右IGF1R基因启动子片段;双酶切及测序鉴定重组体构建正确;转染HeLa细胞后经双荧光素酶报告基因检测确定重组体有启动子活性.结论 成功构建了IGF1R启动子报告基因载体,在细胞系中进行初步的活性分析得知所克隆的IGF1R基因调控序列内包含启动子活性区域.
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