p100蛋白表达抑制的 HepG2肝癌细胞稳定株的建立

JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY(2012)

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摘要
目的 建立 p100 表达抑制的 HepG2 肝癌细胞稳定株,并初步探讨 p100 在 HepG2 肝癌细胞中的功能.方法 用脂质体将含有真核细胞筛选标记 Neo 和 GFP 的 p100 shRNA 表达质粒转染人 HepG2 细胞,检测 HepC2 细胞稳定株 HepG2(p1OOI) 中p100 表达的抑制效果;平板细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;MTS 检测细胞存活;划痕实验检测细胞迁移能力.结果 成功获得了p100 表达抑制的 HepG2 肝癌细胞稳定 HepG2(p100I),其中 p100 的表达明显降低.并且实验表明,该 plOO 表达抑制稳定的克隆形成能力,抵抗化疗药物 Cisplatin 诱导的细胞死亡的能力和迁移能力明显低于对照组细胞.结论 p100 表达抑制的 HepG2 肝癌细胞稳定株的建立为研究 p100 蛋白在肝癌中的作用提供了体外细胞系模,基于此稳定株的研究,发现 p100 能够影响 HepG2 肝癌细胞的多种细胞功能.
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