81例假肥大型肌营养不良症患者基因突变分析

目的：对81例假肥大型肌营养不良症(Duchenne/Becker muscular dystrophy,DMD/BMD)患者进行基因突变分析,探讨中国河南人群 DMD 基因突变的特点。方法收集81例无亲缘关系 DMD/BMD 患者的临床资料,应用多重连接依赖式探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)对患者 DMD 基因进行外显子缺失/重复突变分析；对于 MLPA 检测为单个外显子缺失者,PCR 扩增相应的外显子并进行 Sanger 测序以排除假阳性；对 MLPA 检测为阴性者,应用第二代测序(next generation sequencing,NGS)技术对79个外显子及其剪切位点进行测序,并用 Sanger 测序对微小突变进行验证。结果在81例 DMD/BMD 患者中,98.8%(80/81)检测出 DMD 基因缺失、重复或微小突变。MLPA 技术检测出67例(82.7%,67/81)患者为 DMD 基因外显子缺失或重复突变,且第45~54外显子为缺失热点,其中79.1%(53/67)的患者临床表型符合“阅读框规则”；NGS 和 Sanger 测序检测出13例患者为 DMD 基因点突变,其中新突变6个,已知致病突变7个。新突变中1个为移码突变(c.4708-4709insTG),5个为无义突变(c.8812G>T、c.2131A>T、c.6035T>A、c.3426C>A、c.3055C>T)。结论本研究结果丰富了 DMD 基因突变谱；MLPA、NGS 和 Sanger 测序相结合的检测流程提高了 DMD 基因检测的敏感度和特异性,对于进一步的遗传咨询、产前诊断和基因治疗都有重要意义。