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siRNA介导的HPV16 E6/E7基因沉默对宫颈癌SiHa增殖及凋亡的影响

王平,刘珊,程波,吴西钊,武迪,许琳,石建玲,段恋,孙锁柱

Chinese Journal of Diagnostic Pathology（2015）

Cited 1|Views17
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Abstract
目的 探讨小干扰RNA(siRNA)介导的人乳头状瘤病毒16型(HPV16) E6/E7基因沉默对宫颈癌SiHa细胞增殖及凋亡的影响.方法 设计靶向HPV16 E6/E7基因启动子区的siRNA序列,构建质粒转染SiHa细胞,筛选稳定沉默E6/E7基因的细胞系.用QT-PCR和RT-PCR检测细胞E6/E7基因mRNA的变化、Western blot检测细胞E6/E7蛋白变化;利用MTT、RT-PCR、免疫组化法检测细胞增殖情况,Tunel检测细胞的凋亡情况.结果 成功构建E6/E7基因稳定沉默的细胞株,其mRNA与蛋白沉降效率明显.MTT及Ki-67表达显示细胞增殖活性降低;Tunel显示沉默细胞凋亡增加.结论 siRNA技术可以成功诱导HPV16型E6/E7基因沉默,从而影响癌细胞的生长、增殖和凋亡.
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Key words
iRNA,Human papillomavirus (HPV),Cellular proliferation and apoptosis,SiHa cells
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