Matriptase-2多克隆抗体的制备及鉴定

目的：探讨Matriptase-2重组蛋白的表达及多克隆抗体制备。方法 Matriptase-2胞外区近跨膜段（Glu81-Gly228）克隆入pMAL-C2X，重组质粒转化BL21(DE3)大肠杆菌，经IPTG诱导表达，提取细菌蛋白后用直链淀粉树脂纯化柱进行纯化。将纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔，制备Matriptase-2抗血清；免疫血清用protein G亲和层析柱进行纯化，获得多克隆抗体。结果成功表达了Matriptase-2重组融合蛋白，获得了高效价的抗血清，Western blot结果显示具有抗原特异性识别。结论成功制备了高特异性、高效价的抗人Matriptase-2多克隆抗体，为今后深入研究Matriptase-2的生物学功能提供了有用的实验工具。