登革1型和2型病毒混合感染样本的一步法实时荧光定量PCR检测方法的建立
Acta Parasitology et Medica Entomologica Sinica（2018）
Abstract
本文旨在建立检测登革1型和2型病毒的一步法实时荧光定量PCR方法,为登革热的诊断和预测提供技术支撑.依据登革1型和2型病毒的保守区序列设计引物和探针,建立了同时检测两个血清型登革病毒的一步法实时荧光定量PCR方法.特异性实验结果显示,该方法可检测出登1型和2型病毒,与登革3型、4型病毒、 黄热病毒、 流感H3 N2病毒均无交叉反应,具有较好的特异性.对登革1型和登革2型的灵敏度均为102 copies/μL.应用该方法,可检测出登革1型和2型病毒混合感染C6/36后不同时间点病毒复制动态.在两个血清型登革病毒混合感染C6/36细胞72～120 h登革2型病毒的拷贝数与单独感染时登革2型病毒的拷贝数相比显著下降.上述研究证实建立的一步法实时荧光定量PCR方法具有特异性好灵敏度高、 重复性好等特点,能够用于登革型和2型病毒混合感染样本的检测.
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