山羊胎肝内人脐带间充质干细胞的存活与分化研究

目的 观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)在胎羊肝脏内的存活与分化.方法 妊娠2个月时在胎羊肝脏实质区注射绿色荧光蛋白(GFP)转染标记的hUCMSC(GFP-hUCMSC),出生1月龄时取羔羊肝脏组织,制作切片后在荧光显微镜下观察GFP阳性细胞的分布,采用PCR方法检测人雄性性别决定基因(SRY)的存在;RT-PCR方法检测人肝细胞特异基因的表达;免疫组织化学染色检测人肝细胞特异蛋白的表达.注射同体积生理盐水的同月龄羔羊为对照.结果 在注射了GFP-hUCMSC的1月龄羔羊肝脏组织中可观察到绿色荧光的规则或散在分布,并可检测到人SRY基因的存在.RT-PCR方法可检测到人肝细胞核因子4α(HNF4α)、肝细胞核因子3β(HNF3β)和白蛋白(ALB)基因的阳性表达;免疫组织化学染色可检测到人ALB和HNF4α蛋白的阳性表达,而对照羔羊肝脏检测不到绿色荧光阳性细胞和人SRY基因以及人肝细胞特异基因和蛋白的表达.结论 hUCMSC可以在胎羊肝脏内存活并分化为人肝细胞样细胞,并可在胎羊出生后至少持续一个月.