树鼩大脑皮层少突胶质前体细胞的分离鉴定

目的 建立树鼩大脑皮层少突胶质前体细胞(OPCs)的体外分离、原代培养方法,以及鉴定技术.方法 新生48 h内给树鼩施行安死术后采集大脑,去除脑膜和脑干,留下大脑皮层,然后使用胰酶和DNase Ⅰ联合消化大脑皮层,分离细胞原代培养.通过采用化学分离法和差速贴壁法从原代培养中获得较为纯化的OPCs.对纯化和定向分化的细胞分别进行硫酸软骨素蛋白多糖4(NG2)、髓鞘碱性蛋白(MBP)细胞免疫荧光染色鉴定.结果 纯化后的OPCs,胞体圆形或椭圆形,折光性强,有两极或三极突起,经NG2细胞免疫荧光染色,细胞纯度达97％左右.加入分化培养液后,OPCs可分化发育成熟,经MBP细胞免疫荧光染色为阳性.结论 成功建立了树鼩大脑皮层OPCs的体外分离纯化培养方法.