西藏小型猪骨髓间充质干细胞分离培养及慢病毒载体介导EGFP标记间充质干细胞

目的 建立一种简便、有效的西藏小型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养及纯化方法,并基于BMSCs建立慢病毒介导的外源基因EGFP体外投递系统.方法 密度梯度离心法分离西藏小型猪BMSCs,差速贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测第3代BMSCs CD45、CD90和CD105表达；此外,用携带EGFP基因的慢病毒转染BMSCs以获得EGFP标记的BMSCs,倒置荧光显微镜下观察感染情况及流式细胞术检测感染效率.结果 ①密度梯度分离法结合差速贴壁法所获得的细胞经鉴定符合MSCs的特性.②借助慢病毒高效率将EGFP导入BMSCs,感染效率为84.1％.结论 利用密度梯度分离法结合差速贴壁法可获得高纯度的BMSCs,基于BMSCs 建立了慢病毒介导的外源基因体外投递系统.