miR-18a通过靶向调节SEMA5A影响喉癌Hep-2细胞的增殖与迁移
Progress of Anatomical Sciences(2018)
Abstract
目的 探讨miR-18a对喉癌HEP-2细胞增殖及迁移能力的影响及可能机制.方法 Real-time PCR法检测喉癌组织与癌旁组织miR-124的表达, 免疫组织化学方法检测SEMA5A蛋白的表达.Lipofectamine2000将miR-18a抑制剂与miR-18a模拟物分别转染喉癌HEP-2细胞, real-time PCR法验证转染效率, 采用CCK8法检测miR-18a对喉癌HEP-2细胞增殖的影响, 采用Transwell迁移实验检测转染后HEP-2细胞的迁移能力变化.Real-time PCR与Western blot实验分别检测转染后SEMA5A mRNA和蛋白表达的变化.结果 miR-18a在喉癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织 (P<0.01), 但SEMA5A蛋白在喉癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织 (P<0.01) .miR-18a抑制剂或miR-18a模拟物转染后, 喉癌HEP-2细胞miR-18a的表达显著降低或升高, 转染成功.转染miR-18a抑制剂能够显著降低喉癌HEP-2细胞增殖及迁移能力, 并上调喉癌HEP-2细胞SEMA5A蛋白的表达;转染miR-18a模拟物后, 作用则相反.结论 miR-18a在喉癌组织中表达上调, 靶向调节SEMA5A的表达可能是其促进喉癌HEP-2细胞增殖和迁移的机制之一.
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Key words
miR-18a,SEMA5A,larynx cancer,HEP-2 cells,proliferation,migration
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