赖氨大黄酸通过调控miRNA表达水平抑制HBV增殖

目的：研究赖氨大黄酸在体外对乙型肝炎病毒（HBV）增殖及病毒抗原表达的影响及分子机制，为研究赖氨大黄酸抗 HBV 作用机制奠定初步的实验依据。方法将 HepG2．2．15细胞分为实验组（分别加入5、10、20、40、80μmol／L 赖氨大黄酸）及不加赖氨大黄酸的对照组，分别培养24、48 h 收获上清液，采用四唑氮化合物（M TS）法检测细胞的增殖活性，采用 ELISA 法检测 HBsAg 和 HBeAg 的表达水平，实时定量 PCR（RT‐PCT ）检测其中 HBV DNA 的拷贝数及 miR‐210、miR‐185、miR‐199a‐3p 、miR‐370、miR‐196a 、miR‐184、miR‐217的表达水平。miR‐210、miR‐185、miR‐199a‐3p 、miR‐370、miR‐196a 、miR‐184、miR‐217反义链（ASO）分别转染 HepG2．2．15细胞后，M TS 法检测细胞的增殖活性，ELISA 法检测 HBsAg 和 HBeAg 的表达水平。结果在没有对 HepG2．2．15细胞的增殖活性产生影响的情况下，赖氨大黄酸抑制了 HBsAg 的产生和 HBV 的增殖。20μmol／L 的赖氨大黄酸明显促进了 miR‐210、miR‐185、miR‐199a‐3p 的表达，而抑制了 miR‐370的表达，与对照组相比较，差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论赖氨大黄酸可能通过影响细胞内 miRNA 的表达抑制 HepG2．2．15细胞中 HBV 的增殖和HBsAg 的产生。