清开灵对小胶质细胞缺氧活化诱导的脑微血管内皮细胞Toll样受体4、 gp91phox和闭锁小带蛋白-1表达的影响

目的 探讨清开灵注射液抑制小胶质细胞缺氧活化后,脑微血管内皮细胞Toll样受体4(TLR4)、gp91phox和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)的表达.方法 小鼠BV2小胶质细胞分为6组.正常组和模型组用无血清DMEM培养基培养,低、中、高浓度清开灵组用含清开灵注射液0.0625％、0.125％和0.25％的无血清DMEM培养基培养,米诺环素组用含米诺环素200 nmol/L的无血清DMEM培养基培养.除正常组外,其余各组缺氧24 h后复氧24 h,各组培养液分别加入Balb/c内皮细胞培养液中培养24 h.CCK-8检测内皮细胞活力,比色法检测一氧化氮浓度,Western blotting检测共培养模型内皮细胞TLR4、gp91phox和ZO-1表达.结果 与正常组比较,模型组细胞存活率和ZO-1蛋白的表达明显降低(P<0.01),一氧化氮浓度、TLR4和gp91phox蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,各清开灵组和米诺环素组细胞存活率和ZO-1蛋白表达升高(P<0.05),一氧化氮浓度、gp91phox和TLR4蛋白表达降低(P<0.05).结论 清开灵注射液可通过抑制小胶质细胞缺氧活化,降低脑微血管内皮细胞TLR4和gp91phox蛋白表达,提高ZO-1蛋白表达,提高脑微血管内皮细胞的生存和功能.