miR-194-5p靶向调节CD2AP参与大鼠肾病综合征的发展

目的 探究微小RNA(miR)-194-5p通过靶向调节CD2相关蛋白(CD2AP)参与肾病综合征(NS)发展的机制.方法 通过工具网站starbase预测miR-194-5p靶向CD2AP的潜在结合位点,然后通过荧光素酶报告验证.将大鼠分为3组(n=8):对照组、NS组和antagomir组,NS组和antagomir组通过静脉注射阿霉素建立NS模型.An-tagomir组通过静脉注射miR-194-5p antagomir干预,其余两组注射等量溶剂.比较各组大鼠一般情况、24 h尿蛋白、肌酐水平.通过苏木精-伊红(HE)染色检测肾组织损伤情况.RT-PCR和Western blot检测CD2AP mRNA和蛋白的水平.结果 通过双荧光霉素实验结果 验证了同时转染miR-194-5p mimic和CD2AP-wt的细胞的荧光酶素活性显著降低(P<0.05).过表达miR-194-5p显著抑制CD2AP mRNA和蛋白的表达(P<0.05).NS组大鼠在给药后出现精神萎靡、脱毛、活动力下降等现象,在第2周后开始大鼠出现浮肿,并有竖毛现象.Antagomir组大鼠在给予miR-194-5p antagomir后,各种症状均有所缓解.建模后,NS组和antagomir组大鼠24 h尿蛋白和肌酐水平显著高于对照组,干预后antagomir组的24 h尿蛋白和肌酐均显著降低,并显著低于NS组(P<0.05).NS组肾小球硬化、毛细血管扩张以及肾小球系膜增厚,并可观察到肾小管空泡样变性以及蛋白管型;antagomir组的肾小球和肾小管基本正常,病变情况显著轻于NS组.与对照组比较,干预后NS组大鼠肾组织匀浆中的miR-194-5p显著升高而CD2AP mRNA和蛋白显著降低(P<0.05).而antagomir组的miR-194-5p显著低于NS组,CD2AP mRNA和蛋白显著高于NS组(P<0.05).结论 miR-194-5p靶向抑制CD2AP的表达并参与NS的发病机制,抑制miR-194-5p可促进CD2AP的表达水平,从而减轻NS肾损伤.