BMSCs视网膜下移植对大鼠视网膜光感受器细胞凋亡的影响及机制研究

目的 研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)视网膜下移植对大鼠视网膜光感受器细胞凋亡的影响及机制.方法 取32 只6 周龄的SPF 级SD 雄性大鼠,随机分为A组(未进行任何处理)、B组(于视网膜下注入无菌生理盐水)、 C组(以BMSCs 为溶质,于视网膜下注入磷酸盐溶液)、D组(于视网膜下移植BMSCs2 × 105 /g 个),每组各8 只.其中,C、D组采用光照射1 d,于7 d 后进行手术,术后2 周摘除眼球.大鼠BMSCs 原代和传代培养,切片并行苏木精- 伊红染色,观察BMSCs细胞形态学情况,并对视网膜外核层的层数进行计算.根据免疫荧光法,对大鼠眼内BMSCs 中的睫状神经营养因子(CNIF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达水平进行检测,并根据 Tunel细胞凋亡检测试剂盒对细胞凋亡情况进行检测.结果 BMSCs细胞刚接种时呈圆形,大小均匀,胞体透亮,胞膜清晰;混有红细胞且呈扁平状、大小不均.BMSCs细胞接种1 d 后,贴壁细胞出现,且呈多角形、椭圆形或梭形,而在定期换液中未贴壁的细胞逐渐被清除.BMSCs细胞接种1 周后迅速增长,2 周后80％ 以上的贴壁细胞融合,并呈现漩涡状. D组视网膜外核层的层数明显少于A组,而明显多于B、C组(P ＜ 0.01).D组细胞凋亡率明显高于A组,而明显低于 B、C组(P ＜ 0.01).DAPI 阳性的BMSCs 于视网膜下腔并不表达CNIF 与BDNF,但其表达bFGF.结论 于视网膜下移植BMSCs 具有抑制视网膜光感受器细胞凋亡的作用,作用机制可能与其于视网膜下腔分泌bFGF 有关.