雷帕霉素对人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡及Bax、Bcl-2表达的影响

目的 探讨雷帕霉素对人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡及Bax、Bcl-2表达的影响.方法 体外培养人 HL-60细胞,并将不同浓度(10nmol/L、20nmol/L、40nmol/L、80nmol/L、160nmol/L) 雷帕霉素(溶于 DMSO)作用于HL-60细胞,另设空白对照组和相同体积的DMSO组.然后应用CCK8技术检测各组细胞增殖抑制率,应用荧光显微镜和TdT酶介导的末端缺失原位标记法观察其凋亡情况,应用QPCR、Western blot等方法观察48h不同组别Bax、Bcl-2基因和蛋白表达情况.结果 CCK-8检测结果显示,不同浓度雷帕霉素处理组细胞生长抑制率明显大于对照组和 DMSO组(P＜0.05),而且随着浓度的增加,其抑制率也明显增高.随着雷帕霉素浓度的增加,HL-60凋亡细胞逐渐增多,细胞凋亡率分别为(8.4±1.3)％、(14.7±1.9)％、(28.5±2.7)％、(51.6±5.4)％、(52.7±4.8)％,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01).QPCR和Western blot结果显示,和对照组相比,随着雷帕霉素浓度的增加BaxmRNA和蛋白表达水平逐渐增高,且均远大于对照组(P＜0.01);然而Bcl-2mRNA和蛋白表达水平却随着雷帕霉素浓度的增加逐渐降低,且均远小于对照组(P＜0.01).结论 雷帕霉素可以明显抑制HL-60细胞生长,并可能通过促进Bax表达,抑制Bcl-2生成来诱导HL-60细胞凋亡,且上述作用呈剂量依赖性.